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• Identification de protéines en analyse protéomique (gel 1D avec découpe systématique, gel 2D ou «shotgun») |
• Analyses bioinformatiques des données à haut débit (banques protéiques ou génomiques, séquençage de novo) |
• Identification de partenaires de complexes multiprotéiques |
• Caractérisation complète de protéines |
• Caractérisation fine de modifications post-traductionnelles |
• Etude d’interactions non-covalentes par spectrométrie de masse |
Expertises spécifiques à l’analyse protéomique |
• Préparation de l’échantillon, pré-fractionnement (déplétion, SPE…) |
• Réalisation de gels 1D avec découpe systématique des bandes de 1-2 mm |
• Réalisation de gels 2D avec analyse différentielle d’image. Coloration bleu de cromassie, nitrate d’argent, DIGE. Découpe des spots robotisée |
• Analyse MALDI-MS, LC-MS/MS ou LC-LC-MS/MS |
• Identification des protéines par recherches croisées dans les banques de séquences protéiques et/ou génomiques avec plusieurs moteurs de recherche (Mascot, OMSSA, X !Tandem), contrôle des faux positifs (Target Decoy et Peptide/ProteinProphet). Organisation du rendu des résultats par Scaffold |
• Identification des protéines par séquençage de novo (Peaks Studio, MSBlast) |
• Quantification sans marquage par spectral counting, quantification par MRM |
Principaux domaines d’application |
• Etablissement de cartes protéomiques de référence (microorganismes, cellules eucaryotes, tissus, fluides biologiques, plantes,...) |
• Protéomique comparative et quantitative (marquage, spectral counting, MRM) |
• Recherche de nouveaux biomarqueurs (cancers, Alzheimer, diabète,…) |
• Protéome N-terminal, dégradome et processome par marquage spécifique au TMPP (étude différentielle par 13C-TMPP) |
• Validation des annotations des génomes |
• Caractérisation de phosphorylations |
• Caractérisation de glycosylations homogènes et hétérogènes |
• Recherche et caractérisation d’autres modifications post-traductionnelles (acétylation, myristoylation,…) |
• Caractérisation complète de protéines naturelles ou recombinantes et de leurs impuretés, pour un usage en thérapie humaine (participation aux dossiers pour les autorités de santé) |
• Identification de protéines partenaires de complexes multiprotéiques (après expérience de «pull down» par exemple) |
• Etude par spectrométrie de masse des interactions spécifiques non-covalentes protéine/protéine, protéine/ligand, protéine/ADN, ou protéine/ARN |
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